Синонимы : Lues RPR, rapid plasma reagin syphilis, Кардиолипиновый антиген, реакция микропреципитации, ранняя диагностика сифилиса
В заказ
Цена со скидкой:
193 ₽
Скидка 50%
Цена со скидкой:
193 + ₽ = 193 ₽
Р. RU-NIZ р. RU-SPE р. RU-KLU р. RU-TUL р. RU-TVE р. RU-RYA р. RU-VLA р. RU-YAR р. RU-KOS р. RU-IVA р. RU-PRI р. RU-KAZ р. р. RU-VOR р. RU-UFA р. RU-KUR р. RU-ORL р. RU-KUR р. RU-ROS р. RU-SAM р. RU-VOL р. RU-ASTR р. RU-KDA р. р. RU-PEN р. RU-ME р. RU-BEL
- Описание
- Расшифровка
- Почему в Lab4U?
Анализ будет готов в течение 1 дня (кроме дня взятия биоматериала). Вы получите результаты на эл. почту сразу по готовности.
Срок исполнения: 2 дня, исключая субботу и воскресенье (кроме дня взятия биоматериала) Подготовка к анализу ЗаранееНе сдавайте анализ крови сразу после рентгенографии, флюорографии, УЗИ, физиопроцедур.
НаканунеЗа 24 часа до взятия крови:
Ограничьте жирную и жареную пищу, не принимайте алкоголь.
Исключите тяжёлые физические нагрузки.
От 8 до 14 часов до сдачи крови не принимайте пищу, пейте только чистую негазированную воду.
В день сдачи60 минут до забора крови не курить.
15-30 минут перед забором крови находиться в спокойном состоянии.
Информация об анализеСифилис – хроническое системное венерическое заболевание, передающееся половым путем, возбудителем является бледная трепонема. Инкубационный период составляет в среднем три недели. При генерализации процесса в результате нелеченной инфекции развивается вторичный, а затем третичный сифилис. В ответ на размножение в организме возбудителя происходит выработка противосифилитических антител, поэтому для диагностики сифилиса наиболее широко используются серологические методы
Метод исследования - Флокуляционный тест, (RPR-антиген, использующийся в наборах, является модификацией VDRL антигена).
Материал для исследования - Сыворотка крови
Состав и результаты Сифилис RPRСифилис – хроническое системное венерическое заболевание, передающееся половым путем,возбудителем является бледная трепонема (Treponema pallidum) из семейства Spirochaetaceae. инкубационный период составляет в среднем три недели, по окончании этого периода в месте внедрения возбудителя обычно развивается первичный аффект (безболезненная язва в виде твердого шанкра) и регионарный лимфаденит. При генерализации процесса в результате нелеченной инфекции развивается вторичный, а затем третичный сифилис. В ответ на размножение в организме возбудителя происходит выработка противосифилитических антител, поэтому для диагностики сифилиса наиболее широко используются серологические методы. Общие закономерности иммунного ответа характерны и для выработки противосифилитических антител: вначале вырабатываются антитела класса IgМ, по мере развития болезни начинает преобладать синтез IgG антител. Иммуноглобулины класса М появляются через две-четыре недели после заражения и пропадают из сыворотки крови у нелеченных больных - примерно через 18 месяцев, при лечении раннего сифилиса – через 3 - 6 месяцев, позднего – через год.
Иммуноглобулины класса G синтезируются обычно на 4-й неделе после заражения в более высоких титрах, чем IgМ. Для них характерна длительная циркуляция в организме, они обнаруживаются даже после клинического выздоровления. Сифилитические антитела могут быть неспецифическими (реагины) и специфическими (противотрепонемными). Реагины направлены как против липидных антигенов самой трепонемы так и против аутоантигенов, которые образуются в результате разрушения собственных клеток организма. При различных патологических и физиологических состояниях уровень реагинов может повышаться, поэтому часто они могут быть причиной ложноположительных результатов в ходе серологических реакций на сифилис. Соответственно, специфические противотрепонемные антитела направлены только против Treponema pallidum.
Лабораторная диагностика сифилиса регламентирована приказом Министерства здравоохранения РФ № 87 от 26.03.2001 г. «О совершенствовании серологической диагностики сифилиса», в котором утверждены методические указания по постановке отборочных и диагностических тестов на сифилис. В серологической диагностике сифилиса, в связи с особенностями иммунного ответа на эту инфекцию, используют сочетание неспецифических (нетрепонемных) и специфических по отношению к антигенам возбудителя сифилиса Treponema pallidum (трепонемных) тестов.
Таким образом, последовательность обследования пациентов на сифилис представляется следующим образом:
- При первичном обследовании производится постановка отборочного (скринингового) теста, в частности RPR (неспецифический антифосфолипидный тест), современный аналог реакции Вассермана и в случае положительного результата – любого специфического подтверждающего трепонемного теста (РПГА, ИФА).
- Следующий RPR ставиться после окончания терапии и по понижению титра судят о эффективности терапии и динамике инфекционного процесса. Терапия считается эффективной при снижении титра в 4 и более раз в течение 1 года.
- По окончании этого срока производиться постановка специфического подтверждающего трепонемного теста (РПГА, ИФА). Необходимо учесть тот факт, что противотрепонемные антитела, а следовательно и положительный результат, сохраняются у пациента в течение ряда лет, или даже всю жизнь.
RPR - неспецифический антифосфолипидный (реагиновый) тест, современный аналог реакции Вассермана (RW), модификация VDRL (Venereal Disease Research Laboratory) теста. RPR (Реакция микропреципитации с кардиолипиновым антигеном, РМП, Rapid plasma reagin, RPR) - скрининговое нетрепонемное исследование, выявляющее антитела (реагины) класса IgG и IgM к липоидным и липопротеиноподобным аутоантигенам, которые образуются из поврежденных клеток больного сифилисом. Тест RPR утвержден приказом МЗ РФ для первичного скрининга сифилиса и наблюдения за течением заболевания в ходе лечения. У 70 - 80% больных с первичным сифилисом и почти у 100% больных с вторичным и ранним латентным сифилисом находят антифосфолипидные антитела, которые можно выявить данным тестом. Через 7 - 10 дней после появления первичного шанкра, или через 3 - 5 недель после инфицирования наблюдается позитивная RPR-реакция у большинства обследуемых. После наступления вторичной стадии сифилиса титры RPR значительно снижаются. При позднем сифилисе порядка 30% пациентов становятся нереактивными по RPR-тесту.
Терапия, направленная на борьбу с сифилисом, считается эффективной при снижении титра в 4 и более раз в течение 1 года. Считается, что после лечения RPR-тест становиться отрицательным в 80-90 % случаев. RPR не относится к специфическим тестам. Если результат RPR-теста положителен, пациент должен пройти обследование у дерматовенеролога и повторно сдать кровь для определения антител к трепонемным антигенам Treponema pallidum методом ИФА.
Интерпретация результатов исследования "Сифилис RPR"
Интерпретация результатов анализов носит информационный характер, не является диагнозом и не заменяет консультации врача. Референсные значения могут отличаться от указанных в зависимости от используемого оборудования, актуальные значения будут указаны на бланке результатов.
Положительный результат исследования может свидетельствовать о первичном серопозитивном сифилисе (инфицирование произошло 1 - 3 месяца назад), о вторичном серопозитивном сифилисе (инфицирование произошло более 3 месяцев назад), о третичном серопозитивном сифилисе (инфицирование произошло более 3 - 4 лет назад).
Возможны ложноположительные результаты исследования при беременности, сахарном диабете, туберкулезе, онкологических заболеваниях, аутоиммунных (системных) заболеваниях, подагре, алкоголизме, наркомании, инфекционном мононуклеозе, энтеровирусных инфекциях, вирусных гепатитах, пневмонии.
Отрицательный результат исследования может быть при отсутствии инфекции, однако, он не позволяет исключить ранний первичный (серонегативный) сифилис и поздний третичный сифилис.
Единица измерения: Качественный тест, результат выдаётся в виде: положительный, отрицательный
Референсные значения: отрицательный результат
Lab4U - медицинская онлайн-лаборатория, цель которой сделать анализы удобными и доступными, чтобы Вы могли заботиться о своем здоровье. Для этого мы исключили все затраты на кассиров, администраторов, аренду и прочее, направив деньги на использование современного оборудования и реактивов от лучших мировых производителей. В лаборатории внедрена система TrakCare LAB, которая автоматизирует лабораторные исследования и сводит к минимуму влияние человеческого фактора
Итак, почему без сомнений Lab4U?- Вам удобно выбрать назначенные анализы из каталога, либо в строке сквозного поиска, у Вас всегда под рукой точное и понятное описание подготовки к анализу и интерпретация результатов
- Lab4U моментально формирует для Вас список подходящих медцентров, остается выбрать день и время, рядом с домом, офисом, детским садом или по пути
- Вы можете заказать анализы для любого члена семьи в несколько кликов, один раз внеся их в свой личный кабинет, быстро и удобно получив результат на почту
- Анализы выгоднее средней рыночной цены до 50%, так Вы можете направить сэкономленный бюджет на дополнительные регулярные исследования или другие важные траты
- Lab4U всегда онлайн работает с каждым клиентом 7 дней в неделю, это значит что каждый Ваш вопрос и обращение видят руководители, именно за счет этого Lab4U постоянно улучшает сервис
- В личном кабинете удобно хранится архив ранее полученных результатов, вы легко сравните динамику
- Для продвинутых пользователей мы сделали и постоянно совершенствуем мобильное приложение
Мы работаем с 2012 года в 24 городах России и выполнили уже более 400 000 анализов (данные на август 2017 года)
Команда Lab4U делает все, чтобы малоприятная процедура стала простой, удобной, доступной и понятной. Сделайте Lab4U своей постоянной лабораторией
Исследование крови на сифилис RPR (rapid plasma reagin) назначается пациентам для первичной диагностики венерического заболевания, а также для оценки эффективности терапии. Этот анализ является неспецифическим и проявляет большую чувствительность к обнаружению инфекции на остром этапе ее развития. Тест РПР - более современный аналог реакции Вассермана. Он выявляет антитела к липоидным компонентам, высвобождаемым при повреждении клеток организма бледными трепонамами. Инфекция, попавшая через кожу или слизистые оболочки, со временем поражает внутренние органы, костную и нервную систему. Запущенный сифилис приводит к полной инвалидизации больного.
Когда нужно сдать PRP анализ на сифилисАнализ на сифилис RPR проводится в следующих случаях:
Антикардиолипиновый вид антител выявляют с помощью теста RPR у 70% больных, имеющих первичную форму заболевания.
При вторичной стадии сифилиса положительная микрореакция наблюдается у 98% инфицированных.
На этом этапе развиваются кожные проявления в виде твердых шанкров, представляющих округлые образования с плоским красным уплотненным дном и неровными краями. Они являются источниками заражения здоровых людей при половых или бытовых контактах.
При скрытой форме сифилиса у больных язвы и шанкры не развиваются. Многие исследования, в том числе и методом RPR, могут не выявлять наличие инфекции на первоначальном этапе.
Как подготовиться к обследованию на сифилис PRP методомДля того чтобы анализы показали достоверные результаты, врачи рекомендуют придерживаться определенных правил, несоблюдение которых может привести к искажению данных.
Перед процедурой забора крови не разрешается употреблять пищу. Промежуток между взятием биологического материала и едой должен составлять восемь часов. При этом желательно воздержаться от употребления продуктов с высоким содержанием жиров. Алкогольные напитки накануне проведения анализа пить запрещено. Для того чтобы реакция прошла качественно и показала достоверные результаты, врачи рекомендуют отказаться от курения за час перед забором крови.
При назначении исследования необходимо сообщить врачу о недавно проведенной флюорографии, ультразвуковой диагностике, физиолечении, рентгенографии. Перед тем как сдавать кровь, допускается пить только чистую воду. Кофеинсодержащие напитки, в том числе зеленый и черный чаи, употреблять не разрешается.
Эмоциональная перегрузка и физические тренировки могут отрицательно сказаться на результатах исследования, поэтому за два часа до посещения лаборатории не нужно заниматься спортом, волноваться.
Расшифровка результатов - нормы и отклоненияСифилитический анализ RPR считается качественным. На бланке лаборатории результат отмечается словом «отрицательно» при отсутствии в крови антикардиолипиновых антител. При их выявлении ставится – «положительно». Если титры низкие, на бланке лаборанты отмечают результат словом «сомнительно». В этом случае врачи-венерологи рекомендуют пройти исследование повторно через 1,5-2 недели.
Отрицательный ответ выдается, если:
- у пациента отсутствует инфицирование сифилисом;
- заражение произошло недавно, и антитела еще не появились;
- у больного запущенная стадия венерического заболевания.
RTR-тесты дают положительный ответ в следующих случаях:
Анализы могут быть ложноположительными при определенных заболеваниях:
- сахарном диабете;
- подагре;
- туберкулезе;
- малярии;
- аутоиммунных процессах, повреждающих соединительную ткань.
У беременных женщин, а также лиц, страдающих наркоманией, антикардиолипиновые тесты иногда дают положительные результаты. В этом случае врач-венеролог выписывает повторное направление на исследование, которое рекомендуется проходить через 14 дней после первой сдачи крови.
При получении отрицательного результата анализа RPR и наличии у пациента определенных признаков инфекционного заболевания венеролог может назначить дополнительные исследования.
Основанием для подозрения инфицирования являются высыпания на кожных покровах, слизистых оболочках, воспаленные регионарные лимфатические узлы. При возникновении подобных симптомов врач выдает направление на анализы крови РПГА и ИФА. Эти методы считаются более чувствительными по сравнению с RPR.
Цена вопроса
Срок исполнения анализа RPR в платных учреждениях - 1 рабочий день. При необходимости и своевременной сдаче крови согласно расписанию результаты пациент может получить уже через 2 часа.
В кожно-венерологических диспансерах (по России) и государственных поликлиниках анализы осуществляются бесплатно. Срок выполнения зависит от загруженности лабораторий. Анализ действителен три месяца.
Где сдать анализАнализ на сифилис можно сдать в любых платных диагностических центрах. В Инвитро исследования крови на сифилис проводятся как с помощью неспецифических тестов (RPR, RW), так и с использованием трепонемных методов. В отделениях этого центра общая стоимость анализа составляет около 10$.
Антикардиолипиновые тесты проводятся также лабораторной службой Хеликс. Цена на RPR-анализ составляет здесь 8,9$, включая стоимость процедуры взятия биоматериала. В центре Гемотест цена исследования - 6,3$. Забор крови стоит 3,5$. Срок проведения анализа - одни сутки, не считая день сдачи биоматериала.
Свои услуги по проведению анализа на сифилис RPR предлагает CMD (центр молекулярной диагностики). Общая стоимость с включением забора крови - 9,1$.
Анализы крови на сифилис методом RPR назначаются врачами пациентам, имеющим признаки венерического заболевания или проходящим общее обследование. Для получения точных результатов пациенты должны соблюдать ряд правил, о которых предварительно уведомит врач. Следует сообщить специалисту, если накануне проводились исследования, курсы лекарственной терапии. При выявлении инфекции больному назначаются антибактериальные препараты и поддерживающие иммунную систему средства.
Ничего не сказала доктор про ребенка, надо ли его обследовать? Мог ли ребенок получить инфекцию внутриутробно?
И еще вопрос, глупый, наверное, но не с кем посоветоваться, проконсультироваться (в городе 1 врач-сифилидолог), я сейчас представляю угрозу для близких - мужа, ребенка? Заразна ли я?
У меня теперь всю жизнь будет положительный анализ? Пожалуйста, ответьте, не могу ни есть, ни спать, ни работать. Муж тоже переживает сильно за нас, за ребенка.
Dr.Agapov 10 Июль:14mimi 10 Июль:01Три варианта - либо это серорезистентный сифилис,либо ложноположительный нетрепонемный тест (РМП) при перенесенном ранее сифилисе,либо новое заражение сифилисом при перенесенном ранее сифилисе.
Как отдельный вариант - наличие спирохеты в спинномозговых оболочках (нейросифилис).Это встречается в тех случаях когда лечение вторичного и скрытого сифилиса проводили дюрантными препаратами пенициллина (ретарпен,экстенциллин,бициллин),которые не проникают через гематоэнцефалический барьер.
Лечение цефтриаксоном я уже начала.
Про нейросифилис страшно даже читать. А можно вкратце, как он проявляется? Я конечно же не помню, какими препаратами лечилась ранее. А к невропатологу должен врач направить меня? Наверное, это будет целесообразным после курса лечения сделать и после того, как сдам анализы, да? Или уже сейчас надо идти?
Еще один вопрос - во время лечения следует ли сохранять половой покой? Извините за глупые вопросы, я так была ошарашена результатами анализов, что не спросила у доктора, а она сама об этом не сказала ничего.
Dr.Agapov 11 Июль:11Пациенты с серорезистентностью не заразны,но лучше половые контакты прекратить - так как ситуация с Вами полностью неясна.
mimi 11 Июль:37Информация заставляет задуматься.
Буду ждать направления врача, хотя на прием к нему иду только 25.07 после окончания лечения.
Полная интерпретация анализов на сифилисАнализы на сифилис: виды анализов, расшифровка результатов, причины ложноположительных и ложноотрицательных результатов обследования.Сифилис – это венерическое заболевание, возбудителем которого является бактерия Treponema pallidum (бледная трепонема). Подробнее о путях передачи сифилиса, его симптомах и возможных осложнениях читайте в статье Все о сифилисе. Симптомы и лечение.
Своевременное выявление сифилиса (с помощью специальных анализов) позволяет врачам вовремя начать лечение и предотвратить развитие опасных осложнений этой болезни.
Проведение анализов на сифилис во время беременности помогает предотвратить рождение детей с врожденным сифилисом. Подробно об анализах на сифилис во время беременности рассказано в статье Все о диагностике и лечении сифилиса во время беременности.
Почему мне назначили анализ на сифилис?В подавляющем большинстве случаев у врачей нет возможности получить точные данные о сексуальной жизни пациентов (некоторые люди скрывают детали своей половой жизни или недооценивают риск заражения заболеваниями передающимися половым путем). В связи с этим, для того чтобы защитить людей от возможных последствий их собственной невнимательности или недостатка медицинских знаний, в некоторых случаях врачи назначают так называемые скрининговые анализы на сифилис (то есть анализы, которые сдают большие количества людей).
Врач может назначить вам анализы на сифилис, даже если у вас нет симптомов этой болезни, и вы уверены, что не могли им заразиться.
Необходимость проведения этих анализов связана с тем, что сифилис иногда передается бытовым путем (не через сексуальный контакт) и протекает в скрытой форме (то есть без симптомов).
Как правило, скрининговое обследование назначается в следующих ситуациях:Кроме того, анализы на сифилис периодически проводятся во время лечения (для того, чтобы убедиться в том, что лечение эффективно) и даже после окончания курса лечения, для контроля излеченности.
Какие анализы используются в диагностике сифилиса?Диагностикой и лечением сифилиса занимается врач дерматовенеролог. В диагностике заболевания могут быть использованы следующие анализы:
Осмотр кожи, наружных и внутренних половых органов производится с целью выявления основных симптомов сифилиса: твердый шанкр, увеличение лимфатических узлов, высыпания на коже и пр. (см. Симптомы сифилиса)
Для того чтобы обнаружить бледную трепонему, врачи обследуют под микроскопом мазки (или соскобы), полученные из язв, лимфатических узлов, околоплодных вод у беременных и пр. Кровь под микроскопом не обследуют.
Важно: Если в ваших анализах под микроскопом была обнаружена бледная трепонема, это означает, что вы точно больны сифилисом. Но если анализы показали, что возбудитель сифилиса не обнаружен, нельзя быть полностью уверенным в том, что сифилиса нет. Для того чтобы убедиться, что вы не больны, нужно сдать дополнительные анализы, описанные ниже.
ПЦР (полимеразная цепная реакция) – это сложный и дорогостоящий метод диагностики сифилиса, который позволяет обнаружить ДНК бледной трепонемы в крови или других исследуемых материалах (околоплодные воды, спинномозговая жидкость). Если анализ ПЦР дал отрицательный результат, то, скорее всего, вы не больны сифилисом. Однако при получении положительного результата (то есть, если ПЦР обнаружил ДНК бледной трепонемы в крови), нет 100% гарантии, что вы больны. Это связано с тем, что ПЦР иногда дает ложноположительные результаты (дает положительный результат при отсутствии заболевания). Поэтому если ПЦР дал положительный результат, рекомендуется дополнительно пройти другие методы обследования на сифилис (например, реакцию иммунофлюоресценции (РИФ) и реакцию пассивной гемагглютинации (РПГА)).
Что такое серологический анализ на сифилис?Серологический анализ – это обнаружение в крови особых белков (антител), которые вырабатываются в организме человека в ответ на инфекцию. В отличие от предыдущих методов диагностики, серологические анализы обнаруживают не саму бледную трепонему, а лишь ее «следы» в организме.
Если в вашей крови обнаружены антитела к бледной трепонеме, это говорит о том, что вы либо заражены сифилисом в данный момент, либо переболели им ранее.
Какие анализы указывают на то, что человек болен сифилисом?Серологические анализы на сифилис делятся на 2 большие группы: неспецифические и специфические тесты. Основное различие этих анализов заключается в том, что неспецифические тесты показывают положительный результат только если человек болен сифилисом в данный момент и становятся отрицательными после излечения, а специфические тесты остаются положительными даже после излечения заболевания.
Говоря другими словами, отрицательный результат неспецифического теста является некоторой гарантией того, что вы здоровы.
Какие анализы на сифилис являются неспецифическими (нетрепонемными)?К неспецифическим анализам относят микрореакцию преципитации (МР) и реакцию Вассермана (РВ, RW). Эти тесты используются для скрининга на сифилис. После излечения сифилиса эти анализы становятся отрицательными у 90% людей.
Как работают эти тесты: в результате жизнедеятельности бледной трепонемы (при сифилисе) в организме погибают клетки. В ответ на разрушение клеток иммунная система вырабатывает особые белки (антитела, или иммуноглобулины). Неспецифические тесты направлены на выявление этих антител, а также подсчет их концентрации (определение титра антител).
Микрореакция преципитации (МР) и ее аналоги в некоторых странах: тест быстрых реагинов (RPR, Rapid Plasma Reagins) и тест VDRL (Venereal Diseases Research Laboratory) - это нетрепонемные тесты, которые назначаются при скрининге на сифилис.
Через какое время после заражения анализ становится положительным: как правило, через 4-5 недель после заражения.
Как оценивать результаты анализа: если анализ показал положительный результат, то есть вероятность, что вы больны сифилисом. Так как этот анализ может ошибочно давать положительные результаты, рекомендуется пройти дополнительное обследование с помощью специфических тестов, описанных ниже. Отрицательный результат указывает на отсутствие сифилиса, либо раннюю стадию заболевания (до появления антител в крови).
Как оценивать полученный титр антител: если в крови обнаружены антитела в титре от 1:2 до 1:320 и выше, это означает, что вы заражены сифилисом. При позднем сифилисе титр антител может быть низким (что оценивается как сомнительный результат).
Какие могут быть причины ложноположительных результатов: ложноположительные результаты МР встречаются примерно в 2-5% случаев, вот их возможные причины:
Какие могут быть причины ложноотрицательных результатов: анализ может ошибочно показать отрицательный результат, если в крови содержится много антител, если анализ взят на ранней стадии заболевания до появления антител, либо при позднем сифилисе, когда в крови остается мало антител.
Реакция Вассермана (РВ, RW) - это нетрепонемный тест, который используется для скрининга на сифилис в странах СНГ.
Что обследуют: кровь (из пальца или из вены), спинномозговую жидкость.
Через какое время после заражения анализ становится положительным: как правило, через 6-8 недель после заражения.
Как оценивать результаты анализа: «-» - отрицательная реакция, «+» или «++» это слабоположительная реакция, «+++» это положительная реакция, «++++» это резко положительная реакция. Если реакция Вассермана показала хотя бы один плюс, то вам необходимо сдать дополнительные анализы на сифилис. Отрицательная реакция не является гарантией того, что вы здоровы.
Как оценивать полученный титр антител: титр антител от 1:2 до 1:800 говорит о наличии сифилиса.
Какие могут быть причины ложноположительных результатов: реакция Вассермана может ошибочно дать положительный результат по тем же причинам, что и микрореакция преципитации (МР), а также, если незадолго до сдачи крови на анализ вы пили алкоголь или употребляли жирную пищу.
В связи с большим количеством ошибочных результатов Реакция Вассермана (РВ, RW) используется все реже и заменяется другими, более достоверными методами диагностики.
Неспецифические тесты (микрореакция преципитации (МР) и реакция Вассермана (РВ, RW)) являются хорошими методами диагностики сифилиса. Отрицательный результат обследования с большой вероятностью указывает на то, что вы здоровы. Но при получении положительных результатов этих анализов необходимо дополнительное обследование с помощью специфических (трепонемных) тестов.
Какие анализы на сифилис являются специфическими (трепонемными)?К трепонемным тестам относят следующие анализы: реакция иммунофлюоресценции (РИФ), иммуноблотинг, реакция пассивной агглютинации (РПГА), реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ), иммуноферментный анализ (ИФА).
Специфические тесты назначают людям, у которых выявлены положительные результаты микрореакции преципитации (МР) или реакции Вассермана (РВ). Специфические тесты остаются положительными еще долгое время после излечения сифилиса.
Как работают эти тесты: при попадании в организм возбудителей сифилиса иммунная система вырабатывает антитела, направленные на борьбу с бледной трепонемой. Эти антитела появляются в крови не сразу после заражения, а лишь спустя несколько недель. Примерно в конце второй недели после заражения в крови появляются антитела класса IgM. Антитела этого класса указывают на недавнее заражение сифилисом, однако в отсутствие лечения они сохраняются в крови в течение нескольких месяцев и даже лет (при этом их количество постепенно снижается). Через 4-5 недель после заражения сифилисом в крови начинают определяться антитела другого класса – IgG. Антитела этого типа сохраняются в крови в течение многих лет (иногда в течение всей жизни). Трепонемные тесты позволяют выявить наличие в крови антител (IgM и IgG), направленных на борьбу с бледной трепонемой.
Реакция иммунофлюоресценции (РИФ) или Fluorescent Treponemal Antibody (FTA, и его разновидность FTA-ABS) - это трепонемный тест, который применяется для подтверждения диагноза сифилиса на самых ранних стадиях (даже до появления первых симптомов).
Через какое время после заражения анализ становится положительным: как правило, через 6-9 недель.
Как оценивать результаты анализа: Результаты анализа выдаются в виде минуса или плюсов (от одного до четырех). Если в анализе стоит минус, значит антитела не выявлены, и вы здоровы. Наличие одного плюса и более говорит о наличии сифилиса.
Какие могут быть причины ложноположительных результатов: ложноположительные результаты встречаются редко, однако ошибки возможны у людей с заболеваниями соединительной ткани (системная красная волчанка, дерматомиозит и пр.), у беременных и пр.
Реакция пассивной агглютинации (РПГА), или Treponema pallidum hemagglutionation assay (TPHA) – это специфический тест, который применяется для подтверждения диагноза сифилиса практически на любой его стадии.
Что обследуют: кровь из вены или из пальца.
Через какое время после заражения анализ становится положительным: как правило, уже через 4 недели.
Как оценивать результаты анализа: положительный результат РПГА указывает на то, что вы больны сифилисом, либо здоровы, но перенесли эту болезнь в прошлом.
Как оценивать полученный титр антител: в зависимости от титра антител можно ориентировочно предположить давность заражения сифилисом. Вскоре после первого попадания трепонемы в организм титр антител, как правило, менее 1:320. Чем выше титр антител, тем больше времени прошло от момента заражения.
Иммуноферментный анализ (ИФА), или Enzyme ImmunoAssay (EIA), или ELISA (Еnzyme Linked ImmunoSorbent Assay) – это трепонемный тест, который применяется для подтверждения диагноза и определения стадии сифилиса.
Что обследуют: кровь из вены или из пальца.
Через какое время после заражения анализ становится положительным: уже через 3 недели после инфицирования.
Как оценивать результаты анализа: положительный результат ИФА указывает на то, что вы больны сифилисом, либо перенесли это заболевание ранее. Этот анализ может оставаться положительным и после излечения.
Определение давности заражения сифилисом с помощью ИФА: в зависимости от того, какие классы антител (IgA, IgM, IgG) обнаружены в крови, можно предположить давность заражения.
Диагностика сифилиса:Диагностика сифилиса намного сложнее диагностики других половых инфекций. Это объясняется тем, что возбудитель болезни не задерживается в половых путях, а проникает в организм и успешно прячется в теле человека, до определенного времени не выдавая себя симптомами и внешними проявлениями. И «поймать за хвост» эту инфекцию удается редко. Поэтому медики пользуются косвенными методами - серологическими реакциями, которые показывают не наличие самого возбудителя, а иммунный ответ организма.
Структурное изображение антител
Иммунный ответ - это сложный биохимический процесс, основу которого составляют антитела (белки-защитники) - IgM и lgG. Вначале появляются IgM, где-то спустя 7–10 дней после появления твердого шанкра, и сохраняются они в течение всего раннего сифилиса (то есть первые 2–4 года болезни). В позднем сифилисе IgM постепенно исчезают. Если болезнь обнаружена в раннем периоде, и проведено полноценное лечение, то IgM также исчезают. IgG вырабатываются в организме позже, примерно через 3–4 недели после появления твердого шанкра. Эти антитела сохраняются на всем протяжении болезни и остаются в течение нескольких лет даже после лечения.
Этим объясняется зависимость результатов разных анализов от периода болезни. Нетрепонемные тесты (РМП или RPR) реагируют на IgM. Поэтому они становятся положительными раньше трепонемных, и отрицательными - после проведенного лечения (или в третичном периоде). Трепонемные тесты (например, РПГА) реагируют на IgG, и, соответственно, выдают положительную реакцию позже и остаются положительными после лечения.
Кроме того, IgM, в отличие от IgG, являются очень крупными белками и менее специфичными, тесты на них часто ошибаются - IgM можно легко спутать с другими белками в крови. Поэтому нетрепонемные тесты часто выдают ложноположительные результаты.
Серологические реакции - анализы, которые показывают иммунный ответ организма. На разных периодах сифилиса активизируются разные типы антител. По этим типам врачи определяют стадию сифилиса.
Как результаты анализов связаны с клиническими проявлениямиРезультаты анализов и клинические проявления напрямую зависят от иммунного ответа организма.
Ранний сифилис- Первичный период характеризуется возникновением твердого шанкра - сифилитической язвы. В это время организм только начинает реагировать на инфекцию. Сразу после появления твердого шанкра иммунного ответа еще нет, и анализы крови будут отрицательными (серонегативная фаза первичного периода). Затем постепенно появляются антитела, иммунитет нарастает, и уже скоро серологические реакции дают положительный результат (серопозитивная фаза первичного периода).
Нетрепонемные тесты покажут болезнь через семь–десять дней после возникновения твердого шанкра, трепонемные - через 3–4 недели.
До того, как анализы крови станут положительными, диагноз можно подтвердить с помощью прямых методов диагностики - темнопольной микроскопии или ПЦР. Материалом для этих исследований служит соскоб с твердого шанкра. Эти анализы покажут, есть ли в язве бледные трепонемы или нет. Подробнее о том, как ведет себя иммунитет человека при сифилисе, читайте в отдельной статье.
- В третичном периоде иммунная система перестраивается, реакция организма приобретает аллергический характер: на коже появляются бугорки и гуммы. Снижаются и исчезают lgM, соответственно становятся отрицательными нетрепонемные тесты. Кроме того, в этот период поражается нервная система, и потому становятся положительными анализы при исследовании спинномозговой жидкости.
- После полноценного лечения все кожные проявления исчезают, а нетрепонемные тесты становятся отрицательными. Трепонемные тесты могут оставаться положительными в течение нескольких лет и даже в течение всей жизни. О том, что ждет проболевших сифилисом, читайте в статье «Жизнь после лечения сифилиса».
- Скрытой болезнь может быть как в раннем периоде, так в позднем. В раннем периоде, как правило, становятся положительными трепонемные и нетрепонемные тесты. Исследование спинномозговой жидкости дает отрицательный результат, так как нервная система еще не поражена. В позднем периоде постепенно остаются положительными только трепонемные тесты. Результаты исследования спинномозговой жидкости становятся положительными.
Поздний скрытый и пролеченный сифилис между собой очень похожи: отсутствуют клинические симптомы и остаются положительными серологические реакции. Чтобы различить эти два диагноза, проводят анализ на определение IgM: если антитела «М» есть, то сифилис считается скрытым, если нет - то пролеченным.
Подтверждаем или исключаем сифилис: анамнез, симптомы, анализыПодтвердить или исключить диагноз может только дерматовенеролог. Уролог или гинеколог могут лишь заподозрить болезнь по внешним признакам. И тогда они должны направить пациента к дерматовенерологу для дальнейшего обследования, лечения и наблюдения.
Диагноз «сифилис» основывается на совокупности следующих признаков:
Отрицательный RPR при положительном ИФА/РПГА встречается обычно в позднем периоде. Тогда на наличие инфекции обязательно исследуют спинномозговую жидкость (РИФ-ц, РИТ).
Тогда диагностика усложняется. Здесь врачи опираются только на анализы и сведения о проводимом или непроводимом ранее лечении.
Варианты в этом случае:
- Если нетрепонемный (один из РМП/RW/RPR) и трепонемный тест (РПГА/ИФА) - положительны, проводится дополнительный альтернативный трепонемный тест (ИФА, если первый тест был РПГА, и наоборот - РПГА, если был ИФА). Если тест становится отрицательным, то кровь пациента направляют в экспертную лабораторию и проводят дополнительные анализы. В случае если второй трепонемный тест становится положительным, ставят диагноз: «скрытый сифилис». Такое состояние может наблюдаться некоторое время после проведенного лечения. Если пациенту было проведено до этого лечение, то для того чтобы подтвердить диагноз, проводят дополнительное исследование на IgM. При положительных результатах - диагноз подтверждается, но исследование все равно рекомендуется повторить через 2 недели. При отрицательных результатах сифилис опровергается.
- Если нетрепонемный тест (РМП/RW/RPR) отрицательный, а трепонемный (РПГА/ИФА) положительный, то состояние может оцениваться как «поздний сифилис» или «отсутствие сифилиса», если пациенту было проведено ранее полноценное лечение. Для разграничения этих двух состояний проводят дополнительный тест на IgM (ИФАIgM, РИФ-абс-IgM, Иммуноблоттинг-IgM). Если IgM в крови имеются, ставят «поздний сифилис» и лечат. Если нет - пациент считается здоровым.
- Если RPR (или RW/РМП) положительный, РПГА положительный, а ИФА отрицательный (или наоборот: РПГА «-» и ИФА «+»), то результаты анализов вызывают сомнение и рекомендуется отправить кровь в экспертную лабораторию или провести альтернативные анализы (РИФ, Иммуноблоттинг).
- Если нетрепонемный тест (PMП/RW/RPR) положительный, а трепонемный (РПГА/ИФА) отрицательный, то проводится дополнительный трепонемный тест (ИФА/РПГА). Если он дает положительный результат, то кровь направляют в экспертную лабораторию. Если отрицательный, то диагноз опровергается, а результат нетрепонемного теста признается ложноположительным.
Для более простого понимания материала приведем таблицу расшифровки результатов клинико-лабораторного исследования пациента:
ифа на сифилис положительныйПопулярные статьи на тему: ифа на сифилис положительныйДерматокосметология как направление медицинской деятельности существует с незапамятных времен, поскольку ее предмет отражает постоянное и естественное стремление человека к красоте и здоровью тела.
В последнее время наблюдается повышение частоты воспалительных заболеваний гениталий герпетической этиологии с преобладанием латентного, хронического рецидивирующего течения с развитием различных нарушений репродуктивного и соматического здоровья.
Побочное действие лекарственных средств (ПДЛС) продолжает оставаться одной из актуальнейших проблем клинической медицины, в том числе дерматологии, занимая четвертое место после болезней сердца, онкологических заболеваний и инсульта среди причин смерти.
Выкидыш и замершая беременность для любой женщины, мечтавшей о ребенке, - большое горе. Как не допустить повторения такой ситуации в будущем? Узнайте больше о современных способах выявления и лечения нарушений, предрасполагающих к выкидышу.
Вопросы и ответы по: ифа на сифилис положительныйУ пациентов, прошедших курс лечения, может сохраняться положительный результат, так называемый «серологический шрам».
Т.о. врач должен оценить состояние комплексно на очном приеме. Если сифилис был давно, симптомов нет, других клинических проявлений нет, первая беременность благополучна, то повода для таких мероприятий нет!
У меня следующий вопрос (очень для меня важный!):
На данный момент беременность 32 недели. В 14 недель сдавала в ЖК обязательные анализы и оказалась реакция на сифилис положительной. Ни я ни муж никогда не болели сифилисом, вместе 10 лет, у меня других партнеров не было, у мужа до меня был 1 контакт с презервативом. Сразу было сделано полное обследование в КВД и меня и мужа. Результат: у мужа все отрицательно, у меня - КСР - отрицат.; РПГА - отриц.; РИП - отриц.; РИФ абс. - отриц; ИФА lgM - отриц.; ИФА lgG - положит. т 1/80. Было рекомендовано повторить анализы в 20 недель. Результаты в 20 недель: КСР - отрицат.; РПГА - отриц.; РИП - отриц.; РИФ абс. - отриц; ИФА lgM - отриц.; ИФА lgG - слабоположит. т 1/40. Получила заключение: «Данных за сифилис нет. Сероколебания носят неспецифический характер». И вот в 32 недели опять обязательные анализы в ЖК, результат - ИФА (АТ кTreponema pallidum сум. - положит. т 1/80), ИФА (Микрореакция) - отрицат. В ЖК опять начали гонять к дерматовенерологам, в КВД, опять нервы и т.д. Неужели снова нужно делать полное обследование? На сколько я знаю за 2-3 недели до родов необходимо делать последний, 3-й, обязательный анализ на сифилис. И там скорее всего тоже будет положит. реакция. Очень переживаю! Заранее благодарна за ответ!
P.S. Прошу прощения если аббревиатура некоторых реакций неправильно написана (уж очень неразборчиво в заключении врач написал) 🙂
Здравствуйте. Я вам уже задавала вопрос на сайте «Здоровье Украины» очень кратко. Я полно напишу свою историю. Пожалуйста, проконсультируйте. Какие анализы нужно ещё сдать?
2 года назад был случайный половой контакт открытый.
Через 1,5 месяца начался какой то ужас: длительная лихорадка, в области щитовидки как будто шла какая то работа, что то гудело, потом головные боли, ангины, сильные боли в костях и мышцах сначала колющего характера, потом как кипяток шёл по мышцам,тошнота,Сыпь разовая,частые ОРВИ,которые длительное время не поддавались лечению,отдышка,трудности при дыхании,неприятный запах изи рта, невралгии, ночное потоотделение,сильная слабость, снижение работоспособности. Я превратилась почти в труп. До этого я была здоровой и цветущей девушкой, профессионально занималась танцами.Физически была достаточно вынослива и активна. Простудами вообще практически не болела.Была практически здорова.
Через 1год и 10 месяцев после незащищённого полового контакта сдала тест на вич в 2 разных лабораториях ИФА на антитела к вич отрицательно.
Гепатит В и С отрицательно.
ВЭБ ПЦР отрицательно
ЦМВ ПЦР отрицательно
Вирус герпеса 6 типа отрицательно
Токсоплазмоз ПЦР отрицателно
иммуноглобулин А 3,78 г/л (норма 0.70-4.00)
иммуноглобулин М 4,04 г/л (норма 0.40-2.30)
иммуноглобулин G 12,74г/л (норма 7.00-16.00)
Иммуноглобулин Е 8,49 г/л (норма до 100)
компонент комплемента С3 1,54 г/л (норма 0.9-1.8)
компонент комплемента С4 0,43 г/л (норма 0,1-0,4)
Спонтанная 112 оптич.единицы 80.0-125.0
Индуцированная 212 оптич.единицы 150.0-380.0
Фагоцитарный индекс 1,9 (1.5-3.0)
митогеном Кон.А 1,36 оптич.единицы (1.2-1.68)
ЦИК крупные 18 оптич.единицы (до 20)
ЦИК средние 99 оптич.единицы (60.0-90.0)
ЦИК мелкие 182 оптич.единицы (130.0-160.0)
Т-лимфоциты (СД3+,СД19-) 84,7 %проценты (норма 54-83)
Т-хелперы/Т-индукторы (СД4+,СД8-) 66.1% (норма 26-58)
(СД4+,СД8-/СД4-,СД8+) 3.8 % (норма 1.2-2.3)
(СД3+,СД56+) 5 % (норма 3-8)
NK клетки (СД3-, СД56+) 5,3 % (норма 5-15)
В-лимфоциты (СД3-,СД19+) 9,5% (норма 5-14)
Моноциты (СД14) 1,4% (норма6-13)
Общий лейкоцитарный антиген,СД45 99,8 % (норма
Биохимия положительное СРБ, остальное норма.
Цитирую: «Может, нужно сдать ещё какие то анализы и прийти к вам на приём?» Целесообразно изменить порядок действий: сначала прийти на прием, а потом, выслушав и осмотрев Вас, ознакомившись со всеми имеющимися результатами исследований, разработать программу обследования.
С уважением, Ю.Сухов.
Мне 31 год,я на 35 неделе беремености. 2 месяца назад сдала кровь на инфекции методом ИФА(потому как попала с отрвлением в инфекционное отделение, там и сделали исследование),мой гинеколог не направляла меня сдавать кровь на инфекции на ранних строках беременности (что мне кажется странным, хотя на СПИД и сифилис кровь брали трижды за беременность, все торицательно). Сейчас мне сообщили результаты. Прошу, прокомментируйте, пожалуйста. Некоторые показатели вызывают тревогу, такие как на вирус крснухи, ЦМВ, герпес HSV 1/2, Эпштейн-Барр вирусная инфекция (EBV):
Герпес HSV Ig G 1 типа К=3,4, 2 типа отр.
Эпштейн-Барр VCA K=4,7 NA -
хламидии и микоплазма - отр.
Коэффициент позитивости К=оптическая плотность образца. Если К меньше 0,9 - результат отрицательный, если К от 0,9 до 1,1 - сомнительный, если К больше 1,1 - положительный.
Ig G, EBV, NA значение до 55 у.е./мл может быть в норме, выше этого значения - результат положительный.
Пожалуйста, прокомментируйте! Благодарю за внимание!
Выявление антител IgG к ВПГ1 и ЦМВ лишь свидетельство того что Вы, как и большинство взрослых, пожизненный носитель ВПГ1 и ЦМВ. Само по себе носительство этих вирусов не опасно, вреда не причиняет, лечения не требует. Лечение может потребоваться лишь в случае их активации. С микоплазмами и хламидиями Вы ранее не встречались.
С вирусом краснухи Вы уже знакомы. Если Вы не знаете болели ли Вы когда то краснухой или были вакцинированы, то чтобы убедиться что иммунитет к ней полностью сформирован, лучше проверить авидность IgG к краснухе (должна быть высокой). Тогда у Вас сформирован стойкий пожизненный иммунитет к вирусу краснухи. С иммунитетом Вы сама больше не сможете болеть краснухой, а все Ваши будущие детки будут защищены от них всю беременность и 6-12 месяцев после родов (пока в их крови будут циркулировать Ваши антитела IgG к вирусу краснухи)
С ВЄБ нужно разбираться на очном прийме, т.к. неясно идет речь о антителах IgG к VCA или IgМ.
Какие анализы крови сдают на сифилис: RW, РПГА, ИФА, VDRL, RPR, РИБТ, расшифровка результатов тестовСифилис – заболевание инфекционной природы, обусловленное спирохетой Treponema pallidum, склонное к прогредиентному хроническому течению, с чёткой периодизацией клинической симптоматики.
Преобладание полового пути передачи над контактным и трансплацентарным ставит это заболевание в ряд венерических (ЗППП, ИППП). Помимо указанных способов передачи инфекции особую роль играет артифициальный путь (от лат. «artificio» - искусственно созданный).
Он характерен для медицинских учреждений, в основном, реализуется в условиях стационара. Инфицирование происходит при гемотрансфузиях, различных хирургических операциях, инвазивных диагностических методах.
Несмотря на карантинизацию донорской крови, проблема выявления сифилиса у доноров на разных стадиях заболевания все ещё актуальна.
Поэтому диагностические мероприятия при сифилисе требуют стандартизации, внедрения новых чувствительных и информативных методов идентификации, а также сведения к минимуму ошибок и неправильной трактовки результатов анализов.
Классификация методов лабораторной диагностикиДиагностика сифилиса имеет некоторые особенности и отличается от диагностики других бактериальных инфекций. Сложное строение и антигенные свойства бледной трепонемы обусловливают ошибки в интерпретации результатов серологических реакций.
Сдать анализ крови на сифилис предлагают 3 основным группам пациентов:
Все лабораторные методы условно подразделяют на прямые и непрямые.
Прямые методыСерологические реакции - это методы лабораторной диагностики, базирующиеся на обнаружении антител (сокращенно АТ) к антигенам бледной трепонемы (сокращенно АГ). Они имеют основное значение для подтверждения диагноза.
- Реакция Вассермана (РСК);
- Реакция микропреципитации (МР, РМП) и ее аналоги, которые приведены ниже;
- Тест быстрых плазменных реагинов (RPR, РПР);
- Тест с красным толуидином и сывороткой (TRUST);
- Нетрепонемный тест Лаборатории исследования венерических болезней - VDRL.
- Р-ция иммобилизации Treponema pallidum – РИБТ/РИТ;
- Р-ция иммунофлюоресценции – РИФ, FTA (разведения сывороток РИФ-10, РИФ-200, РИФ-абс);
- Р-ция пассивной гемагглютинации (РПГА, ТРПГА, TPHA);
- Иммуноферментный анализ (ИФА, EIA);
- Иммуноблоттинг.
Рисунок 1 - Алгоритм серодиагностики сифилиса
Гистоморфологические методыЭти методы сводятся к выявлению особенностей гистоморфологии сифилитических проявлений. Внимание уделяется тонкостям строения твёрдого шанкра. Однако, дифференциальная диагностика инфекции с помощью гистологии весьма затруднительна. Гистоморфология используется с другими лабораторными и клиническими тестами.
Микроскопия Treponema pallidum в тёмном полеЭтот метод основывается на непосредственном обнаружении бледной трепонемы в исследуемом материале с помощью микроскопа и специальных приспособлений (чаще всего отделяемое эрозий и язв, реже спинномозговая жидкость и другие субстраты).
С помощью скарификации, соскоба, сдавливания с эрозий и язвенных дефектов получают экссудат, затем исследуют в микроскоп подготовленный препарат.
Обычно бледные трепонемы выявляют в препарате, полученном из шанкра, из очагов вторичного свежего, вторичного рецидивного сифилиса, а также пунктата лимфоузлов, плаценты.
Основанный на феномене свечения мелких частиц в тёмном поле при попадании луча света (феномен Тиндаля), метод прекрасно позволяет дифференцировать возбудителя сифилиса от других трепонем на основании морфологических отличий и отличий в способах передвижения бактерии.
Для микроскопии используют специальный темнопольный конденсор соответствующего оптического разрешения. Препарат получают способом раздавленной капли (каплю материала наносят на чистое обезжиренное предметное стекло и закрывают очень тонким покровным).
На покровное стекло капают иммерсионное масло. С помощью поворота тубуса и поворота увеличивающей линзы регулируют нужное освещение.
В тёмном поле микроскопа обнаруживаются клетки крови, эпителиальные клетки и сам возбудитель сифилиса. Бледная трепонема выглядит как спираль, очень тонкая, излучающая серебристый цвет, с плавными движениями.
Рисунок 2 - Темнопольная микроскопия как способ визуализации бледной трепонемы в исследуемом материале. Источник иллюстрации - CDC
Treponema pallidum необходимо отличать от других трепонем, в том числе и Tr. refringens, которая может содержаться в ротоглотке и на слизистой половых органов. Эта бактерия совершает хаотичные движения, имеет широкие и несимметричные, довольно грубые завитки. Кроме того, Treponema pallidum отличают от Tr. Microdentium, Tr. Buccalis и Tr. vincenti.
Визуализация бактерий в тёмном поле иногда дополняется реакцией флюоресценции. Для этого меченые флюоресцирующим красителем противотрепонемные АТ добавляют в нативный материал. При этом образуется комплекс, называемый антиген-антитело (сокращенно АГ-АТ), который и является объектом для исследования с помощью люминесцентного микроскопа.
Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР)ПЦР, разработанная в 1991 году для обнаружения молекулы дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК) бледной трепонемы, является высокочувствительным и специфичным, позволяет выявить фрагменты ДНК возбудителя.
Базируется данный анализ на копировании коротких участков ДНК бледной спирохеты, который удовлетворяет заданным параметрам и присутствует в образце. Всё это выполняется в искусственных условиях (in vitro). Реакция проводится в приборе - амплификаторе, который обеспечивает периодизацию температурных циклов. Происходит охлаждение с последующим нагреванием пробирок с погрешностью в 0,1˚С.
ДНК-матрицу прогревают в течение 2 минут при температуре 92-98˚С (максимальная температура используется, если полимераза термостабильна). При нагревании цепи ДНК расходятся из-за распада водородных связей между ними. В стадии отжига температуру реакции снижают для связывания праймера с одноцепочечной матрицей.
Отжиг занимает около 30 секунд, в течение этого времени синтезируются сотни нуклеотидов. Вновь синтезируемые молекулы копируются полимеразой, в результате многократно увеличиваются специфические фрагменты дезоксирибонуклеиновой кислоты. Последующая детекция фрагментов проводится с помощью электрофореза в геле агар.
ПЦР-диагностика сифилиса пока носит экспериментальный характер, но оправдана при выявлении врождённой инфекции, в сложных диагностических случаях или при минимальном содержании бледных трепонем в исследуемом материале.
ДНК-гибридизацияДНК-гибридизация выполняется in vitro и основана на полном или частичном соединении двух одноцепочечных молекул ДНК в одну молекулу. В случае полного соответствия комплементарных фрагментов объединение происходит легко. Если комплементарное соответствие частичное, то объединение цепочек ДНК происходит медленно. На основании времени слияния цепей можно оценить степень комплементарности.
При нагреве ДНК в буферном растворе разрываются водородные связи азотистыми основаниями, являющимися комплементарными, в результате цепочки ДНК расходятся. Далее получают препарат из двух денатурированных дезоксирибонуклеиновых кислот. При охлаждении одноцепочечные участки ренатурируют. Образуется так называемый гибрид ДНК.
Метод позволяет оценить и анализировать скорость отжига, учитывая особенности (сходства и различия) ДНК между видами или внутри вида.
Применение ДНК-зонда заключается в гибридизации меченого фрагмента ДНК со специфичным участком ДНК для идентификации комплементарных последовательностей нуклеотидов. Для метки зонда используется группа ненасыщенных атомов (хромофоры) или радиоактивные изотопы.
ДНК–зонд применяют для гетерогенного и гомогенного детектирования нуклеиновых кислот. Роль зонда заключается в определении участков, на которых произошло слияние мишень-зонд. Детектирование в гомогенной системе имеет преимущество - позволяет отследить гибридизацию молекул ДНК в реальном времени.
Суть метода сводится в денатурации ДНК и ренатурации (воссоединения цепочек ДНК). Процесс ренатурации нуклеиновой кислоты и ДНК-зонда заканчивается образованием «гибрида».
Специфические последовательности нуклеиновых кислот гибридизуются с ДНК–зондом и, таким образом, выявляются и позволяют оценить количество ДНК в исследуемом материале.
Заражение лабораторных животныхВысокая чувствительность кроликов к Treponema pallidum (порядка 99,9%) позволяет применять их в диагностике сифилитической инфекции.
Заражение кроликов проводится в научно-исследовательских центрах и является «золотым стандартом» оценки чувствительности других методов.
Вернёмся к трепонемным и нетрепонемным тестам, так как они используются чаще всего. Рассмотрим их преимущества и недостатки, а также ошибки в интерпретации результатов.
Нетрепонемные тестыЭто тесты определения антител IgG и IgM к стандартизированному кардиолипиновому антигену. Их существенным недостатком является сравнительно небольшая специфичность.
Низкая стоимость и простота выполнения позволяют отнести эти тесты к отборочным диагностическим, необходимым для установки предварительного диагноза и скрининга среди населения.
Именно нетрепонемные тесты сдаются при оформлении медицинской книжки, устройстве на работу, постановке на учет в женской консультации.
Получение ложноположительных или слабоположительных проб возможно в следующих случаях:
Как видно из списка, существует достаточно причин для неверного результата. Поэтому к нему следует весьма настороженно относиться. Рассмотрим наряду с РСК ещё две пробы. Это реакция микропреципитации и VDLR (ее модификация).
Реакция связывания комплемента (РСК, Вассермана, RW)Это проба, основанная на способности комплемента связываться с комплексами АГ-АТ. Идентифицируют образовавшийся комплекс с помощью гемолитической системы. Кардиолипиновый антиген заметно повышает чувствительность пробы.
Чувствительной является и реакция Колмера, которая заключается в выполнении при различных температурных режимах. Так, первая фаза реакции Колмера протекает при температуре 20˚С в течение получаса, вторая фаза при тепературе 4-8˚С на протяжении 20-ти часов. За это время происходит связывание комплемента.
При выполнении РСК возможно получение резко положительных результатов. Причиной, вероятно, является большой титр антител в неразведенной сыворотке. В этом случае пробы ставят с уменьшающими дозами.
Для дифференцировки стадий сифилиса и оценки эффективности противосифилитического лечения определяют количество АТ в сыворотке.
Позитивность пробы оценивают с помощью крестов, также в реакциях Вассермана, Колмера и Канна указывается разведение сыворотки.
Реакция микропреципитацииТак как трудоёмкость выполнения вышеуказанных проб велика, то для широты обхвата диспансеризацией разных групп населения разработан ускоренный способ серодиагностики сифилиса, так называемый экспресс-метод – реакция микропреципитации (сокращенно МР, РМП).
Она выполняется с кардиолипиновым антигеном и вспомогательными веществами. Его преимуществом является забор периферической крови для исследования. Это значительно ускоряет и саму методику, и работу лаборантов.
Рисунок 2 - Реакция микропреципитации (схема)
Для проведения МР необходимы плазма или инактивированная сыворотка крови пациента (именно они содержат антитела). Далее плазму помещают в маркированные лунки. Затем, к исследуемому материалу добавляют каплю кардиолипинового антигена, смешивают и встряхивают. В итоге в сыворотке инфицированного появляются характерные хлопья, разные по степени интенсивности.
Это качественная проба. При количественной оценке используются 10 разведений сыворотки, помещаемой в 10 лунок с соответствующей маркировкой. При качественной МР ответ указывается в виде крестов (плюсов) или минуса, при количественной указывается титр антител (1:2, 1:4 и так далее).
Наличие хлопьев расценивается как положительный или слабоположительный ответ. Возможно появление флокулята и при отсутствии заболевания, поэтому окончательную оценку полученного результата проводят после контрольного исследования или проведения других реакций (РИБТ, РИФ, ИФА, РПГА).
Рекомендованный Всемирной организацией здравоохранения метод постановки реакции с антигеном липоидной природы (АГ) по праву считается лучшим среди других стандартных нетрепонемных тестов. Разработан в США, штате Джорджиа в лаборатории венерических болезней (Veneral Diseases Research Laboratories).
Аббревиатура учреждения послужила названием для пробы – VDRL. VDRL - это модификация МР. Сыворотку от больного сифилисом инактивируют и помещают на предметное стекло. Используемый антиген состоит из кардиолипина, холестерина и лецитина в разном процентном соотношении. Ответ регистрируется практически сразу.
Отчётливая флокуляция возникает в присутствии в сыворотке антител. Сыворотка становится реактивна по прошествии 4-х недель после заражения. Для оценки количества антител, сыворотку предварительно разводят в геометрической прогрессии.
Недостатком VDRL является относительно высокая частота ложноположительных результатов.
Их причинами являются всё те же перечисленные выше заболевания.
Трепонемные тесты исполняются со специфическими АГ Treponema pallidum. Они необходимы и обязательны для установления окончательного диагноза. Это реакция иммунофлюоресценции (РИФ), реакции непрямой гемагглютинации (РПГА), иммуноферментный анализ (ИФА) и др.
После положительного результата нетрепонемного теста (RPR, MP, VDRL) всегда должны выполняться трепонемные (чаще комбинация - РПГА, ИФА, РИФ).
Трепонемные тесты более сложны в исполнении, чем экспресс-тесты, и требуют больших затрат денежных средств.
Данная реакция (сокращенно РИФ) используется для диагностики сифилиса, в том числе и скрытых форм, и перепроверки положительных и ложноположительных проб.
РИФ основана на свечении меченых антител при соединении с комплексом антиген-антитело под кварцевой лампой. Метод начал применяться в 60-х годах и отличался простотой выполнения и высокой специфичностью (которая немного уступает РИБТ).
Он имеет несколько модификаций: РИФ-10, РИФ-200 и РИФ-abs.
Наиболее чувствительна РИФ в разведении 10 раз, а остальные - более специфичны. РИФ проводится в двух фазах. К АГ добавляют сыворотку крови пациента. Образуется комплекс АГ-АТ, который исследуется в следующей фазе. Далее меченный с помощью флюоохрома комплекс идентифицируют при микроскопии. Если не наблюдается свечение, это указывает на отсутствие специфических АТ в сыворотке крови.
РИФ-200 является наиболее ценным из всех разведений. Метод предназначен для диагностики различных форм сифилиса, особенно скрытого сифилиса и перепроверки положительных проб.
Реакция иммобилизации бледных трепонем (сокращено РИБТ, РИТ) одна из сложных серологических проб, требующих значительных усилий и финансовых затрат. РИБТ применяют все реже, но актуальность ее сохраняется в диагностике скрытого сифилиса.
Большое значение она несёт в распознавании ложноположительных результатов у беременных женщин и основывается на иммобилизации бактерий в присутствии иммобилизинов – поздних антител.
Результат оценивается на процентном количестве (%) иммобилизированных трепонем с помощью специальной таблицы:
Ложноположительные результаты также возможны при применении РИБТ. Так, неверный ответ возможен при инфицировании тропическими трепанематозами, а также, при туберкулёзе, циррозе печени, саркоидозе и пациентов старческого возраста.
Этот анализ крови на сифилис называется реакцией пассивной гемагглютинации (сокращенно, кровь на РПГА, ТРПГА).
Антиген для РПГА приготавливают из эритроцитов барана, покрытых фрагментами бледных трепонем (полученных от инфицированных кроликов (см. рисунок 4)). Для анализа используется венозная кровь (плазма или инактивированная сыворотка) пациента.
При добавлении антигена в сыворотку пациента с сифилисом происходит образование комплекса АГ-АТ, который приводит к агглютинации эритроцитов. агглютинация определяется субъективно врачом-лаборантом.
Рисунок 3 - Схема РПГА (реакция пассивной гемагглютинации)
Проба оценивается как положительная при появлении агглютинатов равномерной розовой окраски. Окрашивание преципитата в красный свидетельствует об осаждении эритроцитов. РПГА является высокочувствительной и высокоспецифичной.
Реакция микрогемагглютинацииОна является упрощённым вариантом РПГА. Отличается от пробы, описанной выше, меньшим количеством антигена, разбавителя и сыворотки крови для выполнения реакции. Через 4 часа после инкубации сыворотки можно оценить пробу. Используется при скрининговых и массовых обследованиях на сифилис.
Иммуноферментный анализИммуноферментный анализ (сокращенно ИФА) базируется на специфической реакции антиген-антитело. Биологический материал (сыворотка крови пациента, ликвор) вносят в лунки, на твердой поверхности которых фиксированы антигены бледной трепонемы. Исследуемый материал инкубируют, затем отмывают антитела, не связавшиеся с антигенами (см. рисунок 5).
Идентификация полученного комплекса осуществляется на этапе ферментации с помощью иммунной сыворотки, меченной ферментом. При химической реакции фермент окрашивает полученные комплексы. Интенсивность окрашивания зависит от количества специфических антител в крови пациента и фиксируется спектрофотометром.
Рисунок 4 - Схема ИФА (иммуноферментного анализа)
Чувствительность ИФА составляет более 95% . Метод используется в автоматизированном режиме для исследования декретируемых групп населения: доноров, беременных и других, для уточнения диагноза при положительных и ложноположительных нетрепонемных тестах.
ИммуноблоттингИммуноблоттинг – высокочувствительный метод, модификация простого ИФА. Реакция основана на электрофорезе с разделением антигенов бледных трепонем.
Разделенные иммунодетерминанты переносят на нитроцеллюлозную бумагу и проявляют в ИФА. Далее инкубируют сыворотку и смывают не связавшиеся антитела. Полученный материал обрабатывают иммуноглобулинами (IgМ или IgG), меченными ферментом.
Клиническая оценка результатов лабораторной диагностики сифилисаВ таблице 1 ниже мы привели возможные результаты анализов и их расшифровку. Как можно видеть в таблице, основное значение при расшифровке имеет комплексная оценка тестов.
Таблица 1 - Расшифровка результатов серологических реакций (анализов крови на сифилис). Для просмотра кликните по таблице
Оценка реактивности тестов выполняется также «крестами»:
Проблема оптимизации лабораторной диагностики сифилиса не потеряла свою актуальность до настоящего времени. Современные методы диагностики, несмотря на стремление учёных привести диагностику к максимально высоким показателям чувствительности и специфичности, требуют контрольной проверки и индивидуального подхода.
Особенностью сифилитической инфекции является феномен серорезистентности, который так и не получил научного объяснения. Диагноз выставляется после полноценного обследования больного эпидемиологическими, клиническими, лабораторными методами.
На фоне экономико-технического развития медицины наблюдается и прогресс в разработке новых критериев диагностики сифилиса. Всё это позволит быстро, успешно и безошибочно лечить пациентов.
по применению «Люис RPR тест»Набор реагентов для быстрого определения реагиновых антител к кардиолипину, лецитину, холестерину в плазме или сыворотке крови человека при диагностике сифилиса
1. НАЗНАЧЕНИЕ
Набор реагентов «Люис RPR тест», далее по тексту – Набор, предназначен для диагностики сифилиса с использованием нетрепонемного теста. 2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА2.1. Принцип действияВ «Люис RPR тест» диагностикум приготовлен на основе раствора холестерина, кардиолипина и лецитина, к которому добавлены частицы угля для облегчения визуального учета результатов. При взаимодействии антигена с реагиновыми антителами сыворотки образуются агрегаты черного цвета, видимые невооруженным глазом. В отсутствии реагиновых антител частицы угля остаются в мелкодисперсном состоянии.
^ 2.2. Состав набора
| Ингредиент | Количество | Описание |
| Диагностикум | 5 мл (два флакона) | Смесь кардиолипина, лецитина и холестерина с добавлением мелкодисперсных частиц угля. Суспензия черного цвета, при хранении разделяется на 2 фракции: верхнюю – прозрачную бесцветную жидкость, нижнюю – осадок черного цвета (взвесь частиц угля). Содержит консервант – азид натрия в концентрации 0,1%. |
| Положительный контрольный образец (К+) | 1 мл (один флакон) | Сыворотка крови человека с клинически и серологически подтвержденным диагнозом сифилиса, содержащая реагиновые антитела к кардиолипину, лецитину, холестерину – инактивированная прозрачная жидкость, бесцветная или слегка желтоватого цвета. Содержит консервант - азид натрия в концентрации 0,1%. |
| Отрицательный контрольный образец (К-) | 1 мл (один флакон) | Сыворотка крови человека, не содержащая реагиновые антитела к кардиолипину, лецитину, холестерину и к Treponema pallidum – инактивированная прозрачная жидкость, бесцветная или слегка желтоватого цвета. Содержит консервант – азид натрия в концентрации 0,1%. |
| Пластинки для реакции | 50 шт (одна упаковка) | Карточки из ламинированного пластиком картона с 10-ю полями для постановки реакции с окрашенными окружностями, в пакете из полиэтилена. |
| Палочки для смешивания | 500 шт (одна упаковка) | Деревянные, в пакете из полиэтилена. |
| Флакон для розлива | 3 мл (одна штука) | Из прозрачного пластика в пакете из полиэтилена. |
| Игла для розлива (20 размер) | 1 шт | В пакете из полиэтилена. |
● При работе с образцами сыворотки (или плазмы) крови пациентов следует обращаться как с потенциально инфекционными объектами, соблюдая меры предосторожности (СП 3.3.2.1288-03).
● Не разрешается модифицировать процедуру проведения анализа, сокращать продолжительность времени постановки реакции, использовать реагенты других производителей, а также реагенты других серий Набора «Люис RPR тест».
● Необходимо предусмотреть меры по предотвращению перекрестной контаминации реагентов.
● Компоненты «Люис RPR тест» содержат 0,1% азид натрия в качестве консерванта, который может быть токсичен при попадании внутрь.
^ 4. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ, НЕОБХОДИМЫЕ ПРИ ПРОВЕДЕНИИ АНАЛИЗА
1. Полуавтоматические дозаторы со сменными наконечниками, с диапазоном дозирования жидкости 10-100 мкл, 100-1000 мкл;
2. Таймер;
3. Холодильник;
4. Перчатки латексные;
5. Миксер с орбитальным вращением SHAKER S3 или аналогичный орбитальный ротатор.
^ 5. АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ
В реакции могут быть использованы прогретые и непрогретые сыворотки или плазма крови пациента. Нельзя использовать образцы со следами бактериального пророста, гемолизированные или хилезные. Допускается хранение проб при температуре минус 20 °С в течение 4-6 недель.
^ 6. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
6.1. Подготовка растворов и реагентов
Все реагенты и пробы до начала проведения анализа выдержать 30 мин при температуре от 18 до 25 °С.
Перед употреблением хорошо взболтать суспензию диагностикума (флакон 1).
Приготовить систему для розлива диагностикума. Для этого снять крышку с пластикового флакона для розлива и плотно подсоединить иглу к его горлышку. Для заполнения системы сжать флакон и опустить конец иглы в суспензию диагностикума (флакон 1). Ослабить давление на пластиковый флакон, чтобы суспензия набралась внутрь. Возможно использование пипеточного дозатора со сменным наконечником.
Хранение диагностикума в пластиковом флаконе сокращает срок его годности. Оставшуюся после тестирования суспензию перелить в исходный стеклянный флакон. После этого пластиковый флакон с иглой промыть дистиллированной водой и высушить на воздухе.
После вскрытия упаковки с пластинками для реакции хранить их только при температуре от 18 до 25 °С. Не прикасаться пальцами к кружкам.
^ 6.2. Проведение анализа
Качественный метод.
С помощью полуавтоматического дозатора нанести 50 мкл сыворотки или плазмы на кружок пластинки.
С помощью пластикового флакона для розлива с насаженной иглой (или полуавтоматическим дозатором) нанести на кружок 1 каплю (16 мкл) диагностикума рядом с каплей сыворотки, не смешивая.
С помощью палочки для смешивания соединить обе капли, равномерно распределив их по всей поверхности кружка.
Поместить пластинку на платформу орбитального ротатора и вращать в горизонтальной плоскости в течение 8 мин при скорости 100 об/мин.
Каждая постановка должна обязательно включать реакцию с положительным (К+, флакон 2) и отрицательным (К-, флакон 3) контрольными образцами, входящими в состав набора. Реакция с контрольными образцами ставится аналогично вышеописанной схеме проведения качественного анализа.
^ Полуколичественный метод.
Реакция проводится с серийными разведениями (1:2 – 1:1024) тестируемого образца сыворотки в 0,9% растворе натрия хлорида (физиологическом растворе), осуществляемыми с помощью полуавтоматического дозатора:
Нанести по 50 мкл физиологического раствора на кружки для тестирования.
Добавить 50 мкл сыворотки или плазмы в кружок №1 и перемешать несколько раз с физиологическим раствором, набирая и выпуская сыворотку с помощью автоматического пипеточного дозатора.
Той же автоматической пипеткой-дозатором перенести 50 мкл в кружок №2 и повторить процедуру смешивания. Перенести 50 мкл в кружок №3.
Повторить ту же процедуру с кружками № 3-10, перенося по 50 мкл соответствующего разведения в следующий кружок. В результате должны получить тестируемые сыворотки в разведениях 1:2; 1:4; 1:8; 1:16; 1:32; 1:64; 1:128; 1:256; 1:512; 1:1024. Из последнего кружка удалить 50 мкл.
С помощью пластикового флакона для розлива с насаженной иглой нанести на каждый кружок 1 каплю (16 мкл) диагностикума рядом с каждой каплей разведенной сыворотки, не смешивая.
С помощью палочки для смешивания смешать обе капли, распределив их по всей поверхности каждого кружка (от большего разведения к меньшему).
Поместить пластинку на платформу орбитального ротатора и вращать в горизонтальной плоскости 8 мин при скорости 100 об/мин.
Немедленно произвести учет результатов (не допускать высыхания).
^ 7. РЕГИСТРАЦИЯ И ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ
7.1. Интерпретация результатов при качественном анализе:
Учет результатов проводится визуально при хорошем освещении:
ПОЛОЖИТЕЛЬНАЯ РЕАКЦИЯ - Наличие средних и больших
Агрегатов при просветлении
Реакционной среды
СЛАБАЯ РЕАКЦИЯ - Образование редких
Небольших агрегатов
ОТРИЦАТЕЛЬНАЯ РЕАКЦИЯ - Видимые агрегаты отсутствуют,
Наблюдается равномерное
Распределение частиц
Равномерного серого цвета
Реакция К+ в присутствии - Средние и большие агрегаты
диагностикума
Реакция К- в присутствии - Видимые агрегаты отсутствуют,
Диагностикума наблюдается равномерное
Распределение частиц
^ 7.2. Интерпретация результатов при полуколичественном анализе:
Учет результатов производят визуально при хорошем освещении, как описано для качественного анализа. Титром образца следует считать последнее разведение, в котором определяется слабоположительный результат. Титр К+ в присутствии диагностикума ≥ 1:2. Титр К- в присутствии диагностикума отсутствует.
ПРИМЕЧАНИЕ :
Следует иметь в виду, что при использовании «Люис RPR тест» иногда наблюдаются ложноположительные реакции у больных с другими заболеваниями. Поэтому любой положительный результат должен быть проконтролирован с помощью метода, использующего специфический трепонемный антиген, например «Люис РПГА тест» (производства ООО «НИАРМЕДИК ПЛЮС»), либо других специфических наборов реагентов.
Цена: по запросу
Вы можете добавить товар в корзину, указав количество
Производитель: Ниармедик
Страна: Россия
Ед. изм.: упаковка
Вид упаковки: картонная коробка
Артикул: 7-02-4
Описание
Набор реагентов Люис RPR тест для определения реагиновых антител к кардиолипину, лецитину, холестерину в плазме или сыворотке крови человека при диагностике сифилиса Люис RPR (Rapid Plasma Reagin – антикардиолипиновый) тест-система для первичного скрининга и оценки эффективности лечения сифилиса в быстром плазмореагиновом тесте Рассчитана на проведение 500 исследований, включая контрольные образцы
Функциональное назначение
Качественное и количественное определение при обследовании доноров, профилактическое и первичное обследование при подозрении на сифилис, диагностика скрытого сифилиса, контроль эффективности лечения (снижение титра в 4 и более раз).
Быстрый плазмареагиновый тест (аналог микрореакции) - флоккуляционный тест на наличие антител к кардиолипину/ холестерину/ лецитину (сорбированных на мелкодисперсных частицах угля для улучшения визуализации преципитата).
Получение результата в течение 8 минут.
Для проведения анализа достаточно 50 мкл непрогретой плазмы или сыворотки крови из пальца.
Наиболее чувствительная из нетрепонемных тест-систем. Снижает вероятность феномена прозоны с высокотитражными сыворотками.
Готовые к употреблению высокостабильные реагенты, включая контрольные сыворотки и устройство для дозированного раскапывания. Постановка на одноразовых планшетах с 18-мм лунками, удобство раститровки и количественной постановки.
*Назначение диагностического теста - Скрининг и оценка эффективности лечения сифилиса.
Принцип исследования - Нетрепонемный флоккуляционный тест.
Определяемый показатель - Реагиновые антитела при скрининговой диагностике сифилиса.
Контрастирующее вещество для облегчения визуального учета - мелкодисперсный уголь - обязательно.
Количество определений - не менее 500 (пластинки для реакции не менее 50х10 определений)
Срок годности - не менее 18 месяцев с даты производства.
Остаточный срок годности при поставке - не менее 15 месяцев.
Срок годности компонентов после вскрытия флаконов - не менее 2 месяцев.
Время анализа — не более 8 минут.
Температура проведения анализа — комнатная.
Подготовка компонентов - Готовые к употреблению компоненты, включая контрольные сыворотки.
Флаконы-дозаторы для раскапывания антигена должны входить в комплектацию тест-системы - обязательно.
Наличие регистрационного удостоверения МЗ РФ (№ ФСР 2008/03715).
Набор полностью соответствует требованиям ТУ 9398-006-40371634-2008.
Состав набора (в упаковке — не менее 500 тестов):
1. Тест эритроциты - 2фл.х5 мл, суспензия красно-коричневого цвета при хранении разделяется на две фракции.
2. Контроль положительный (К +) - 1 мл, прозрачная жидкость желтоватого цвета, во флаконах-капельницах.
3. Контроль отрицательный (К -) - 1 мл, прозрачная жидкость желтоватого цвета, во флаконах-капельницах.
4. Пластинки для реакции - 50 шт.
5. Флакон для розлива - 3 мл.
6. Игла для розлива реагента 20го размера.
7. Палочки для смешивания - 500 шт.
Объем реакционной смеси - 100 мкл.
Стабильность результатов в течение 12 часов